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人膽囊上皮細(xì)胞永生化+GFP

Immortalization of human gallbladder epithelial cells

貨號：YJ-004a（免疫熒光鑒定）

價格： 3200.0

規(guī)格： 5*10 ⁵

細(xì)胞詳述

膽囊，是位于右方肋骨下肝臟后方的梨形囊袋構(gòu)造，有濃縮和儲存膽汁之作用。膽囊壁由粘膜、肌層和外膜三層組成。

膽囊內(nèi)面以粘膜覆蓋，有發(fā)達(dá)的皺襞。膽囊收縮排空時，皺襞高大而分支；膽囊充盈時，皺襞減少變矮。粘膜上皮為單層柱狀，內(nèi)分散分部著少量杯狀細(xì)胞。膽囊粘膜細(xì)胞具有典型的吸收型細(xì)胞的特征，具有較強的吸收和濃縮功能，上皮細(xì)胞吸收膽汁中的水和無機鹽，經(jīng)細(xì)胞側(cè)面的質(zhì)膜轉(zhuǎn)運至上皮細(xì)胞間隙內(nèi)，吸收的水和無機鹽通過基膜進(jìn)入固有層的血管和淋巴管內(nèi)。同時，膽囊粘膜亦有分泌功能，分泌粘液。

該細(xì)胞通過慢病毒轉(zhuǎn)染的方式攜帶SV40基因。

細(xì)胞特性

1) 細(xì)胞來源于人膽囊組織。

2) 細(xì)胞鑒定：細(xì)胞角蛋白19（CK-19）免疫熒光染色為陽性。

3) 經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。

4) 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。

5) 細(xì)胞生長方式：上皮樣，多角形細(xì)胞，貼壁培養(yǎng)。

細(xì)胞篩選

該細(xì)胞為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染GFP的細(xì)胞，隨細(xì)胞傳代次數(shù)的增加，其GFP熒光強度會逐漸減弱。若實驗要求需要維持熒光強度，可以加入嘌呤霉素進(jìn)行再次篩選。

建議收到細(xì)胞后至少傳3代，凍存留種后再進(jìn)行篩選。

初次進(jìn)行細(xì)胞篩選時，建議加入終濃度為1ug/ml嘌呤霉素的完全培養(yǎng)基維持培養(yǎng)，若無細(xì)胞漂浮或者漂浮較少，即可更換為含2ug/ml嘌呤霉素的完全培養(yǎng)基繼續(xù)篩選，以此類推，至最高藥物濃度為5ug/ml。若篩選過程中，漂浮細(xì)胞大于60%，則停止篩選，換成正常培養(yǎng)基培養(yǎng)，至細(xì)胞密度約80%，可繼續(xù)加入同濃度嘌呤霉素進(jìn)行篩選。當(dāng)加入5ug/ml嘌呤霉素時細(xì)胞正常增殖，可停止篩選，用不含藥完全培養(yǎng)基正常培養(yǎng)。

產(chǎn)品的運輸和保存

視天氣狀況和運輸距離遠(yuǎn)近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。

1) 1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運輸；收到細(xì)胞后請盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作，凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個月。

2) T-25培養(yǎng)瓶充滿完全培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運輸；收到細(xì)胞后請鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài)，如鋪瓶率超過85%請立即進(jìn)行傳代操作，如懸浮的細(xì)胞較多，請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。

產(chǎn)品使用

1) 本產(chǎn)品僅能用于科研

2) 本產(chǎn)品未通過直接用于活體動物和人的審核

3) 本產(chǎn)品未通過用于活體診斷的審核

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